Gripe Suína: Gripe suína / A (H1N1).

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Subsecretaría de Prevención y Promoción de la Salud

Centro Nacional de Vigiancia Epidemiológica y Control de Enfermedades

Dirección General Adjunta de Epidemiología

Dirección General Adjunta del InDRE

18 abril 2009

Intensificación de la Vigilancia Epidemiológica ante el aumento en la transmisión de influenza

estacional con presencia de casos de neumonía grave de rápida evolución en México

Mensajes centrales

• En los meses de marzo y abril de 2009 se ha observado en nuestro país un aumento en el

número de casos de influenza estacional. Esta situación es inusual, ya que en años previos el

pico de casos se ha presentado en diciembre.

• De acuerdo a los resultados de laboratorio, el virus circulante en México no es de influenza

aviar, se trata del tipo de virus endémico que ocasiona brotes cada año. Además se han

presentado algunos casos de neumonía grave de rápida evolución en adultos en edad

reproductiva

• Ante esta situación el Sistema Nacional de Salud ha iniciado un operativo de vigilancia

epidemiológica intensificada

Introducción

La infección respiratoria por virus de influenza afecta a toda la población mundial en brotes

estacionales. Se trata en general de una infección leve, que sin embargo puede ocasionar

complicaciones graves en personas susceptibles (personas con patologías respiratorias previas,

adultos mayores, personas con enfermedades crónicas o inmunocomprometidas).

En México, los virus de influenza A y B, causantes de la influenza estacional, circulan a lo largo de

todo el año, con predominio en los meses de invierno. En el año 2009, el Sistema Nacional de

Vigilancia Epidemiológica (SINAVE) ha recibido el reporte de 4,167 casos probables, de los cuales 313

(7.5%) se han confirmado. Considerando la totalidad de la temporada de influenza (octubre 2008 –

marzo 2009), se han reportado 7,237 casos, de los cuales se confirmaron 346 (4.8%). Este bajo

porcentaje de confirmación es esperable en un sistema de vigilancia de influenza, que busca

mantener una alta sensibilidad. Se ha recibido asimismo el reporte de 15 brotes en diversos estados

de la República, con números de casos probables que fluctúan entre 4 y 41 personas, y porcentajes

de confirmación variables. Gracias a estos reportes, el SINAVE ha tenido la capacidad de detectar tres

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aspectos particulares de la influenza estacional en la temporada 2008‐2009: a. un aumento en el

número de casos, b. el desplazamiento del pico de la temporada, que habitualmente aparece en

diciembre y en esta ocasión inició en marzo, c. un incremento en la proporción de infecciones

debidas a virus de influenza tipo B, y d. aparición de casos de neumonía grave de rápida evolución

con mayor letalidad.

Ante esta situación, el Sistema Nacional de Salud ha iniciado un operativo de vigilancia

epidemiológica y acciones para disminuir la transmisión del virus. En este documento se presenta la

situación de transmisión de la influenza estacional en esta temporada, y las acciones para intensificar

la vigilancia epidemiológica que oriente las acciones de prevencción y lineamientos para el manejo

de muestras en laboratorio.

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SITUACIÓN EPIDEMIOLÓGICA

Brotes de influenza estacional, 2009

En el año 2009, se han reportado 15 brotes de probable influenza. La tabla siguiente muestra la

localización geográfica, personas afectadas y resultados diagnósticos.

Tabla 1. Brotes de probable influenza reportados en el año. México, 2009

Localidad Entidad Fecha inicio del brote Probables Confirmados Tipo Defunciones

El Reparo Hidalgo 20‐ene‐09 4 0 0

Apizaco Tlaxcala 03‐feb‐09 5 0 0

Contla Tlaxcala 10‐feb‐09 3 1 B 0

Atotonilco Tlaxcala 16‐feb‐09 2 1 B 0

Orizaba Veracruz 01‐mar‐09 10 0 0

Ojinaga Chihuahua 01‐mar‐09 9 0 0

Ixtacuixtla Tlaxcala 05‐mar‐09 41 12 A (11) B (1) 0

Huamantla Tlaxcala 09‐mar‐09 30 7 A (6) B (1) 0

Pañhe Hidalgo 10‐mar‐09 3 2 B 0

La Gloria Veracruz 12‐mar‐09 591 2 A 0

El Cuarto Hidalgo 24‐mar‐09 3 1 A 0

Huejutla Hidalgo 24‐mar‐09 10 0 0

San Felipe Hidalgo 25‐mar‐09 6 3 A (1) B (2) 0

INER DF 01‐abr‐09 25 6 AH1N1 (2) B (1) 6

Mexicali BC 02‐abr‐09 3 proceso 1

San Luis Potosí SLP 14‐abr‐09 14 proceso 4

Casos probables en brotes 2009, por fecha de reporte

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Semana Epidemiológica

Entre los brotes y casos reportados más recientemente, se encuentran:

Brote en San Luis Potosí, San Luis Potosí: el 14 abril 2009 se inició la investigación epidemiológica de

10 probables casos de neumonía atípica. Posteriormente, la búsqueda activa ha encontrado cuatro

casos más, para un total de 14, de los cuales tres han fallecido. El cuadro clínico se caracteriza por

fiebre elevada, cefalea, astenia y dificultad respiratoria, y el grupo de edad más afectado es el de 25 a

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44 años. Las muestras de estos casos se enviarán al Instituto de Referencia y Diagnóstico

Epidemiológicos (InDRE) para identificación del agente causal. La siguiente figura muestra las fechas

de inicio de síntomas de estos casos.

Casos de neumonía grave en por fecha de inicio de síntomas. San Luis Potosí, 2009

Caso de neumonía en Oaxaca, Oaxaca: el 13 de abril del 2009 se reportó la defunción de una mujer

de 39 años, por neumonía de probable origen viral. Los resultados diagnósticos de laboratorio por el

InDRE han resultado negativos para influenza tipos A y B, parainfluenza tipos 1, 2, 3 y 4, virus sincicial

respiratorio, adenovirus, metapneumovirus y coronavirus 229E, NL63 y OC43.

Brote de enfermedad respiratoria en La Gloria, Perote, Veracruz: Se detectaron 616 casos, con mayor

afección en menores de 5 años. En 2 de las 31 muestras recibidas en INDRE se confirmó influenza

tipo A.

Brotes de influenza en Tlaxcala: En la primera quincena de marzo se reportaron dos brotes en

población escolarizada (un colegio de bachilleres y un preescolar). Se confirmó influenza en 30 casos.

Casos en el Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (INER): En este Instituto han ingresado

25 casos de neumonía compatible con infección viral, de los cuales han fallecido seis. Se ha

confirmado influenza A en 2 casos y B en 1 caso.

Situación de influenza estacional en los Estados Unidos

Considerando la amplitud de la frontera compartida entre México y los Estados Unidos (EUA), es

importante conocer las características de la transmisión de influenza en ese país. De acuerdo con la

información de los Centers for Disease Control (CDC), el pico de la temporada de influenza en esta

temporada se presentó en ese país en las semanas epidemiológicas 5 a 9 del año 2009, y

actualmente se encuentra en descenso. Los estados de la frontera con México presentan aún

transmisión del virus en la mayor parte de su territorio, sin embargo esta es menor que la que se

CENAVECE/DGAE/InDRE Vigilancia Epidemiológica Influenza con Neumonía Grave…5

observa en los estados de la costa oriental. La mortalidad atribuible a influenza en ese país ha sido

menor en esta temporada en relación con lo observado en años previos.

Influenza estacional, 2006‐2009

La influenza estacional se presenta en nuestro país en los meses de invierno. Como se ve en la figura

siguiente, el número de casos probables se ha incrementado en los últimos años, posiblemente en

relación con el refuerzo en el sistema de vigilancia epidemiológica de influenza (SISVEFLU).

Por otro lado, el porcentaje de positividad en la temporada 2008‐2009 (4.8%) es inferior al de la

temporada pasada (2007‐2008). Esta situación puede resultar de menor número de casos

confirmados o aumento en el número de casos probables en los que no se tiene la oportunidad

diagnóstica.

Semestre Probables Confirmados % Confirmado

Abril 2006-Septiembre 2006 1373 16 1.2

Octubre 2006-Marzo 2007 4268 203 4.8

Abril 2007-Septiembre 2007 1635 90 5.5

Octubre 2007-Marzo 2008 4545 258 5.7

Abril 2008-Septiembre 2008 1950 28 1.4

Octubre 2008-Marzo 2009 7237 346 4.8

El tipo de influenza que circula con mayor frecuencia en nuestro país es el A. En esta temporada, sin

embargo, se ha observado un incremento en el porcentaje de casos en los que se aísla influenza tipo

B. En la temporada 2008‐2009, el 41.7% de los casos corresponden a influenza B, y el 58.3% a

influenza A, lo que representa un incremento en relación con la temporada pasada, cuando sólo el

3.6% de los aislados correspondieron a influenza B. Las siguientes tablas comparan los subtipos

circulantes en esta temporada y la previa.

CASOS PROBABLES POR MES, 2006-2009

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

1800

enero

febrero

marzo

abril

mayo

junio

julio

agosto

septiembre

octubre

noviembre

diciembre

MES

CASOS PROBABLES

2006 2007 2008 2009

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Tabla 2. Subtipos circulantes de virus de influenza, temporadas previa y actual. México.

Subtipos circulantes Temporada 2008‐2009

A/BRISBANE/59/2007 (H1N1) 6

B/FLORIDA/04/2006 1

H1 19

H3 30

PCR MD Infl B / IHA B 1

Indeterminado 250

Total 307

IRA y Neumonía

En el año 2009, el número de casos de infección respiratoria aguda se incrementó desde la semana 1

hasta la 11, manteniéndose en zona de alarma del canal endémico durante las semanas 6 a 10. En

cambio, los casos de neumonía reportados al sistema de vigilancia semanal de padecimientos de

notificación obligatoria han disminuido desde la semana 1, manteniéndose en la zona de éxito del

canal endémico. Sin embargo, los reportes de neumonías graves de rápida evolución en adultos

jóvenes son inusuales.

Subtipos circulantes Temporada 2007 -2008

A/Brisbane/10/2007 -Like (H3N2) 1

A/BRISBANE/10/2007 (H3N2) 5

A/BRISBANE/59/2007 (H1N1) 2

B/FLORIDA/04/2006 4

H1 67

H3 57

Indeterminado 142

Total 278

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Plan táctico de intensificación de la vigilancia epidemiológica

El Comité Nacional de Vigilancia Epidemiológica se reunió en sesión extraordinaria el jueves 16 abril

2009 para acordar un plan táctico de intensificación de la vigilancia epidemiológica. Con base en este

acuerdo, la Dirección General Adjunta de Epidemiología, instruye a todas las unidades de vigilancia

epidemiológica del país instrumentar el sigueinte plan operativo.

• Definiciones operacionales

o Probable influenza: Persona de cualquier edad que presente fiebre, tos, y cefalea,

acompañadas de uno o más de los siguientes signos o síntomas: rinorrea, coriza,

artralgias, mialgias, postración, odinofagia, dolor torácico, dolor abdominal,

congestión nasal. En menores de cinco años de edad, se considera como un signo

cardinal la irritabilidad, en sustitución de la cefalea.

o Síndrome de dificultad respiratoria aguda por neumonía: Persona de cualquier edad

que presente sensación de dificultad al respirar, acompañada de fiebre, tos, dolor

torácico y polipnea (respiración rápida).

o Mortalidad hospitalaria por síndrome de dificultad respiratoria aguda por neumonía:

Se notificará toda defunción cuya causa básica sea síndrome de dificultad

respiratoria aguda por neumonía definido en el párrafo inmediato anterior.

Acciones ante casos

Para la detección se deberán aplicar las definiciones operacionales:

• Definición de casos probables de influenza en todas la unidades médicas de primer y segundo

nivel, y en las unidades monitoras

• Definición de síndrome de dificultad respiratoria aguda por neumonía en unidades

hospitalarias centinela.

Acciones ante un caso probable de influenza:

• Al detectarse un caso, se deberá notificar inmediatamente a través del formato en línea en el

portal Internet de la Dirección General Adjunta de Epidemiología www.dgepi.salud.gob.mx,

el cual se utilizará también para llenar la información de seguimiento. También puede

hacerse la notificación a notifica@dgepi.salud.gob.mx, y el envío de estudios de caso al

correo flu@dgepi.salud.gob.mx

• Se realizará toma y envío de muestra para diagnóstico, de acuerdo con los procedimientos de

laboratorio señalados más abajo

Acciones ante un caso de síndrome de dificultad respiratoria aguda por neumonía de rápida

evolución:

1. Notificación inmediata del caso (en las primeras 24 horas de conocido por cualquiera de las

unidades de salud) y captura en el formato en línea. En este mismo sistema se capturará la

CENAVECE/DGAE/InDRE Vigilancia Epidemiológica Influenza con Neumonía Grave…8

información que completa el estudio epidemiológico de caso. Adicionalmente, la información

puede enviarse al correo notifica@dgepi.salud.gob.mx

• Contemplar en esta notificación la información a los diferentes niveles técnico operativos

del Sector Salud (jurisdiccional‐delegacional‐estatal) de acuerdo con la NOM‐017‐SSA2‐

1994

• Deberá incluir los signos y síntomas descritos que avalen el caso (cumplan definición

operacional)

2. Tomar muestra a la totalidad de los casos.

• Las muestras de laboratorio se tomarán de acuerdo con las especificaciones de

laboratorio descritas posteriormente.

Acciones ante una defunción con síndrome de dificultad respiratoria aguda por neumonía de

rápida evolución:

• Notificación inmediata de la defunción en las primeras 24 horas de conocida por los servicios

de salud. La notificación deberá incluir los signos y síntomas que avalen que corresponde a

definición de caso. Esta notificación se hará mediante el formato en línea.

• En caso de no contar con una muestra del paciente al momento de su ingreso, asegurar toma

de muestras postmortem (tejido de pulmón, hígado, corazón, etc.) así como su envío al

Laboratorio Estatal y al Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos (InDRE). Ver

procedimiento para manejo y transportación de muestras.

• Obtención de copia del expediente clínico del paciente.

• Envío de la clasificación preliminar de la defunción por parte del epidemiólogo estatal a

notifica@dgepi.salud.gob.mx en un período no mayor de 10 días hábiles.

• Dictamen por Comité Estatal de Vigilancia Epidemiológica (CEVE) de la defunción en un

período no mayor de 10 días hábiles.

• Ratificación o rectificación de la clasificación de la defunción por el Comité Estatal de

Vigilancia Epidemiológica u homólogo en periodo no mayor de cuatro semanas y envío del

dictamen correspondiente a notifica@dgepi.salud.gob.mx. Deberá contarse con toda la

información clínica epidemiológica, así como los resultados del LESP y el InDRE.

• Revisión de la documentación (estudio de caso, expediente clínico y acta) por el Comité

Nacional de Vigilancia Epidemiológica (CONAVE) para avalar o no el dictamen.

• Las defunciones no clasificadas bajo los criterios descritos en los párrafos anteriores serán

dictaminadas por el CONAVE y se ingresarán a los registros oficiales.

• Realizar la vigilancia clínica, virológica y de factores de riesgo canalizando la información

correspondiente a los comités jurisdiccionales y estatales de Vigilancia.

CENAVECE/DGAE/InDRE Vigilancia Epidemiológica Influenza con Neumonía Grave…9

Toma de muestra:

• ver sección de Laboratorio

Vigilancia de la mortalidad:

• Se dará seguimiento a los reportes de mortalidad, para detectar cualquier aumento en el

número de fallecidos cuyo certificado de defunción consigne como causa básica alguna

de las siguientes claves CIE10: crup y epiglotitis (J5), gripe y neumonía (J10‐J18.9),

bronquitis aguda (J20), bronquiolitis aguda (J21), infección respiratoria aguda sin

especificar (J22) o síndrome de distrés respiratorio agudo (J80).

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El Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias realizará diagnóstico de laboratorio de sus

propias muestras y será referencia para el Hospital Gea González. Su diagnóstico será considerado

como confirmatorio para la vigilancia epidemiológica y las muestras positivas y el RNA viral

obtenido serán enviados al InDRE para proceder a caracterización posterior y envío a red FluNet.

LABORATORIO

RECOMENDACIONES DEL COMITÉ ASESOR DIAGNÓSTICO DE INFLUENZA LABORATORIO

Coordinadora Dra. Celia Alpuche Aranda, InDRE

Dr. José Luis Valdespino, BIRMEX; Dr. José Ignacio Santos Preciado, Fac Medicina UNAM; Dr.

Francisco Quiñones, INER; Dra. Dra. Norís Pavía Ruz, Hosp. Infantil de México; Dra. Dra. Rosa María

Wong Chef, Fac. Med UNAM; Dr. Edgar Enrique Sevilla Reyes, INER; Dr. Ariel Corrales, INER; Dr,

Arturo Galindo Fraga, INCMNSZ; Dr. Santiago Avila Rios, INER; Dr. Gonzalo Salgado, INER; Dr. Alberto

Díaz, InDRE; M. en C. Irma López, InDRE; QBP, Miguel Iguala, InDRE; M en C. Rita Flores, INDRE

Después de revisar los datos diagnóstico por laboratorio de influenza y la caracterización virológica

del InDRE/LESP reportes 2007,2008 y 2009, el Comité Asesor concluyó que:

1) Las cepas actuales identificadas como endémicas no nos permiten definir si se trata de

circulación tardía del año invierno 2008‐2009 o circulación temprana de las cepas del

invierno 2009‐2010 particularmente la B/Brisbane 2008

2) Es una situación semejante a lo descrito a nivel mundial y particularmente a lo que está

ocurriendo en los Estados Unidos de Norteamérica

3) Puede tratarse de una cepa endémica más virulenta pero no hay evidencia que lo sustente

4) El algoritmo diagnóstico, su alcance en cobertura y calidad que realiza el InDRE/RLESP es

adecuado y se evalúa con estándares internacionales

5) El InDRE debe mantenerse como rector de toda la red de diagnóstico

6) Se incorpora al INER como laboratorio de la red de diagnóstico de vigilancia epidemiológica.

7) Se recomienda considerar la incorporación de otros INSalud que realizan diagnóstico de

influenza como, así como otros Hospitales Federales de Referencia a la Red de Diagnóstico

para la Vigilancia Epidemiológica, de acuerdo a capacidades actuales y potencial de

reforzamiento y los lineamientos estándares de control de calidad.

8) Se considera la posibilidad de utilizar pruebas rápidas (Quick Vue Detección de anticuerpos

Influenza A y B, QUIDEL > Cat. No. 00317) con fines de tamizaje diagnóstico sin perder el

muestreo para vigilancia virológica (doble hisopado). Esto puede favorecer el vínculo con

Hospitales y favorecer el desarrollo del diagnóstico en Hospitales Centinela.

9) La información virológica 2008 y 2009 no permite hacer recomendaciones sobre frecuencia

de resistencia a antivirales por lo que se recomienda reforzar esta área en el InDRE.

10) El InDRE anexa información sobre toma y manejo de muestras, insumos necesarios para la

misma y punto de contacto para información de laboratorios.

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Algoritmo para el diagnóstico de influenza

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Toma de muestra para diagnóstico por laboratorio

Material

1. Tubos de ensayo de 13 x 100 mm de poliestireno o vidrio, con tapa de rosca (estériles),

conteniendo 2.5 ml de medio de transporte viral o solución salina estéril al 0.85% y gradilla

(para exudados faríngeos y nasofaríngeos).

2. Hisopos con mango de plástico estériles (con punta de rayón o dacrón) y abatelenguas

estériles (para exudados faríngeos).

3. Hisopos con mango de alambre flexible estériles (con punta de rayón o dacrón) (para

exudados nasofaríngeos).

4. Hielera conteniendo hielo o una bolsa refrigerante para mantener las muestras a 4°C.

5. Formato de la solicitud de procesamiento de muestras (anexo No. 4).

6. Guantes, cubrebocas, batas, tela adhesiva y bolígrafo.

Exudado faríngeo

7. El exudado faríngeo se recomienda para niños y adultos y la forma adecuada para tomarlo y

obtener una buena muestra para la detección de virus respiratorios es la siguiente:

8. Se sujeta la lengua del paciente con el abatelenguas y se frota con firmeza la pared posterior

de la garganta (orofaringe) con el hisopo con mango de plástico estéril (con punta de rayón o

dacrón) al frotar obtenemos células infectadas por el virus; se debe tener cuidado de no

tocar la úvula para no provocar el vomito en el paciente.

9. El hisopo se introduce en el tubo de ensayo (que contiene medio de transporte viral o

solución salina estéril), la parte del hisopo que contiene la muestra se mantiene dentro del

tubo, el resto se corta y se desecha, el tubo se cierra perfectamente y se mantiene a 4ºC.

10. Cada tubo se marca colocando una tela adhesiva (evitar papel engomado, masking‐tape o

“diúrex”), en la cual se escribe el nombre del paciente y la fecha de la toma.

11. Los tubos con las muestras deben mantenerse en refrigeración o en la hielera con la bolsa

refrigerante si van a ser transportadas, (ver transporte de las muestras), hasta su

procesamiento en el laboratorio.

4‐

8°C

CENAVECE/DGAE/InDRE Vigilancia Epidemiológica Influenza con Neumonía Grave…13

Exudado nasofaríngeo

1. El exudado nasofaríngeo se recomienda para bebés y niños muy pequeños menores de cinco

años; la forma adecuada para tomarlo y obtener una buena muestra para la detección de

virus respiratorios es la siguiente:

2. Recostar al paciente y elevar un poco su cabeza, introducir suavemente el hisopo con mango

de alambre flexible estériles (con punta de rayón o dacron), paralelo al paladar, casi en su

totalidad hasta llegar a la nasofaringe (aproximadamente 2.5 cm en adulto y un poco menos

en niños); una vez ahí, rotar suavemente el hisopo para frotar la pared de la nasofaringe (al

frotar obtenemos células infectadas por el virus) y retirarlo cuidadosamente sin dejar de rotar.

Esto se hace para ambas narinas con diferente hisopo.

3. Introducir la punta del hisopo en el tubo de ensayo (que contiene medio de transporte viral

estéril o solución salina al 0.85% estéril), el resto se corta y se desecha, el tubo se cierra

perfectamente y se mantiene a 4ºC.

4. Cada tubo se marca colocando una tela adhesiva (evitar papel engomado, masking‐tape o

“diúrex”), en la cual se escribe el nombre del paciente y la fecha en que se hizo el exudado

faríngeo.

5. Los tubos con las muestras deben mantenerse en refrigeración (o en la hielera con la bolsa

refrigerante si van a ser transportadas, ver transporte de las muestras), hasta su

procesamiento en el laboratorio.

Nota: Las muestras para aislamiento viral deberán refrigerarse inmediatamente después de

tomarlas y se deberán inocular lo antes posible, ya sea en embrión de pollo o en cultivo celular.

De no poder procesarse las muestras en las próximas 48 a 72 hrs, se mantendrán entre 4‐8ºC.

Evitar mantener las muestras por mas de 5 días en refrigeración (muestra en medio de transporte

viral) o más de 24 horas si las muestras fueron recolectadas en solución salina, para que el virus

no pierda infectividad.

Sangre periférica

La toma deberá hacerse en un lugar perfectamente iluminado y con el paciente cómodamente

sentado. Localizar una vena adecuada en la cara anterior del codo y colocar el torniquete en la

4-8°C

Hisopo

rayón o

dacron

CENAVECE/DGAE/InDRE Vigilancia Epidemiológica Influenza con Neumonía Grave…14

parte media del brazo. Desinfectar el área con un algodón humedecido con alcohol al 70% e

introducir la aguja con el bisel hacia arriba. Si la sangre no fluye espontáneamente y se está

utilizando una jeringa, jalar el émbolo y aspirar con suavidad; si se está empleando equipo al

vacío presionar el tubo de ensaye hacia arriba. Al empezar a fluir la sangre retirar el torniquete y

una vez que se haya obtenido la cantidad de sangre requerida (generalmente 6‐10 mL), retirar la

aguja y colocar una torunda con alcohol sobre el sitio de punción ejerciendo presión para detener

la hemorragia. Si la toma se hizo con jeringa, retirar la aguja y verter la sangre a un tubo estéril,

dejándola resbalar lentamente por la pared para evitar hemólisis. Tapar el tubo cuidadosamente.

La toma de sangre es para la obtención de suero, no usar ningún anticoagulante.

Lavado broncoalveolar: realizarlo por personal médico experto de cada unidad y el material

obtenido al menos 2 ml mantenerlo de 4‐8°C y enviarlo dentro de las siguientes 12 h al InDRE o

contactar al 01‐800‐0044‐800 para mayor información.

Manejo de muestras de tejidos de biopsias y autopsias:

Muestras en fresco; colocar el tejido en medio de transporte viral

Muestras fijadas: con cualquier método (formol etc) del área de patología que las realiza. Tejidos

prioritarios: pulmón y ganglios linfáticos.

Medio de transporte viral

Para preparar 100 ml

1. Albúmina bovina al 5 %............................................................ 10 ml

2. Gentamicina (4 mg/ml) ............................................................ 2.5 ml

3. Penicilina / estreptomicina (50,000 U/50,000 μg ..................... 1.0 ml

4. Fungizona (l mg/ml) ................................................................ 0.25 ml

5. NaHCO3 al 7.5 % ................................................................. 0.4 – 0.7 ml

6. Solución balanceada de Hank’s........................................... . 85.5 ml

7. Ajustar el pH de 7.0 a 7.2 y esterilizar por filtración.

8. Envasar 2.5 ml en tubos estériles.

Solución salina balanceada de Hank´s:

Componentes g/litro

1. NaCl......................................................................................... 8.0 g/l

2. KCl........................................................................................... 0.4 g/l

3. MgSO47H2O.............................................................................. 0.2g/l

4. CaCl2H2O............................................................................ 0.185g/L

5. Na2HPO4.............................................................................. 0.046g/l

6. KH2PO4................................................................................. 0.06g/l

7. Glucosa................................................................................... 1.0g/l

8. NaHCO3.................................................................................. 0.35g/l

9. Rojo de fenol........................................................................ 0.02g/l

Albúmina bovina al 5%

5 g de albúmina bovina fracción V en 100 ml de agua.

Esterilizar por filtración.

CENAVECE/DGAE/InDRE Vigilancia Epidemiológica Influenza con Neumonía Grave…15

Transporte de las muestras clínicas

Procedimiento

1. Es importante tener en cuenta que los virus requieren de células vivas para replicarse,

consecuentemente la cantidad de virus no se incrementará después de ser tomada la

muestra, sino al contrario, declinará dependiendo de la temperatura y de otras condiciones.

Por lo tanto es importante que el tiempo en tránsito sea lo más corto posible: antes de 24

horas, si las muestras están en solución salina y máximo 5 días si el medio de transporte

contiene alguna proteína estabilizadora, las muestras siempre se transportan entre 4‐8 ºC.

2. En el caso de haber sido tratada en el laboratorio los sobrenadantes se congelaran a ‐20ºC

transportándose rodeados de refrigerantes y hielo seco, los sedimentos se fijaran en laminillas

para inmunofluorescencia con teflón y se enviaran a temperatura de refrigeración. Nota: Los

laboratorios de la red que tienen la capacidad de realizar la prueba de inmunofluorescencia

indirecta y han sido liberados por el InDRE, enviaran todos los sobrenadantes (en hielo seco)

acompañados de una copia de su correspondiente solicitud de laboratorio y sus resultados de

inmunofluorescencia, para llevar a cabo el aislamiento viral.

3. Los laboratorios de la red que tienen la capacidad de realizar la prueba de

inmunofluorescencia indirecta y no han sido liberados por el InDRE enviaran todas sus

laminillas para llevar a cabo el aseguramiento de la calidad, acompañados de una copia de su

correspondiente solicitud de laboratorio y su hoja de trabajo con los resultados de sus

lecturas de inmunofluorescencia, así como los sobrenadantes (en hielo seco) para realizar el

aislamiento viral.

4. Una vez que las muestras han sido colocadas en el interior del recipiente térmico, ésta se

cierra y debe sellarse perfectamente con tela adhesiva.

5. Las muestras de biopsias o autopsias siguen el mismo procedimiento de transporte en 4‐8°C

dentro de las primeras 24 horas tomadas las muestras en fresco. Las muestras fijadas pueden

transportarse a temperatura ambiente

6. El recipiente térmico debe rotularse de la siguiente forma:

Emisión de resultados de laboratorio:

1) Unidad Hospitalaria que envía muestras al InDRE debe nombrar un contacto en su unidad

para que reciba el resultado oficial de laboratorio.

2) El Resultado para la vigilancia epidemiológica se pondrá en la hoja de captura en línea del

estudio de caso y allá podrá ser consultada por la jurisdicción en tiempo real, y en paralelo

se enviarán el resultado impreso oficial.

3) El INER puede emitir sus resultados en línea de la

Se anexa a continuación información en detalle de insumos para toma y transporte de muestras.

CENAVECE/DGAE/InDRE Vigilancia Epidemiológica Influenza con Neumonía Grave…16

SOLICITUD DE MATERIALES Y REACTIVOS PAREA PROCESAR 250 MUESTRAS POR INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA

DEPTO. / AREA

MAYOR

LABORATORIO /

PROGRAMA

PARTIDA RENGLÓN DESCRIPCIÓN DEL PRODUCTO

EXISTENCIA EN

ALMACÉN

UNIDAD DE MEDIDA

CANTIDAD A

ADQUIRIR

MARCA REQUERIDA

PRECIO

ESTIMADO

IMPORTE proveedores

Virología Virus Respiratorios 2502

Albúmina Bovina Fracción V

Frasco con 100 g 1

ROCHE Cat.

No.

10735086001

$ 2,530.00 $ 2,530.00

amplibio

Virología Virus Respiratorios 2502

Anti IgG de raton marcado con

FITC para detección de

influenza A y B por

inmunofluorescencia frasco

con 10 ml.

para 250 pruebas 1

Ligth

Diagnostics,

Chemicon, Cat.

No. 5008

$ 3,010.00 $ 3,010.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2502

Estuche para el diagnóstico de

5 virus respiratorios (Virus

Sincicial Respiratorios,

Parainfluenza 1, 2, 3,

Adenovirus, Influenza A yB)

Incliye anticuerpo marcado con

FITC, liquido de montaje,

laminillas para control da

calidad

Estuche para 50

pruebas por virus

Ligth

Diagnostics,

Chemicon, Cat.

No. 3105

$ 17,300.00 $ 17,300.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2502

Estuche para el diagnóstico de

Influenza tipo A

frasco con 2 ml, para

50 pruebas

Ligth

Diagnostics,

Chemicon, Cat.

No. 5001

$ 1,800.00 $ 5,400.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2502

Estuche para el diagnóstico de

Influenza tipo B

frasco con 2 ml, para

50 pruebas

Ligth

Diagnostics,

Chemicon, Cat.

No. 5002

$ 1,800.00 $ 5,400.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2502

Liquido de montaje para

inmunofluorescencia frasco

con 10 mililitros,

para 250 pruebas 1

Ligth

Diagnostics,

Chemicon, Cat.

No. 5013

$ 810.00 $ 810.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2502

Solución salina balanceada de

Hank´s

frasco con 500

mililitros.

Gibco

Cat No. 24020-

117

$ 2,070.00 $ 2,070.00

accesolab

Virología Virus Respiratorios 2502 Sulfato de Gentamicina Frasco con 100 g 1

Sigma

Cat. No. G-3632

$ 950.00 $ 950.00

ctr

Virología Virus Respiratorios 2502

Solución de penicilinaestreptomicina

'100 X con

10,000 unidades/mililitros de

penicilina y 10 miligramos de

estreptomicina para cultivo

celular

Frasco de 100

mililitros

Sigma Cat. No.

P0781

ctr

Virología Virus Respiratorios 2502 Tween-20 Grado electroforesis

frasco con 500

mililitros

Sigma Cat. No.

P-1379

$ 650.00 $ 650.00

ctr

Virología Virus Respiratorios 2505

hisopos de rayón o dacrón con mango

de plástico de 15 cm de largo,

estériles, envoltura individual, caja con

100 piezas.

Caja con 100 Piezas. 3

DAIGGER

CATALOGO

TX6824B

$ 1,200.00 $ 3,600.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2505

Cubreobjetos De 22 X 22

milimetros, espesor de 0.25

milímetros, caja con 100

piezas.

caja con 100 piezas. 3

Corning Cat No.

2936

$ 40.00 $ 120.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2505

Cubreobjetos De 24 X 50

milimetros, espesor de 0.25

milímetros, caja con 100

piezas.

caja con 100 piezas. 3

Corning Cat.

No. 2935

$ 118.00 $ 354.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2505

Tubo de poliestireno

desechable de 13 X 100

miíimetros, con tapón de rosca,

estéril, caja con 1000 piezas

caja con 1000 piezas 1

DAIGGER Cat.

No. TX23642E

$ 4,320.00 $ 4,320.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2505

Unidad de filtración tipo

pirinola. Consiste en un

portafiltros de 25 mm de

diametro, para jeringa que

membrana de Acetato de

celulosa poro 0.22 !m estériles

con menbrana de baja afinidad

a proteínas y libres de

pirógenos

caja con 50 piezas 20

Corning Cat.

No. 431222

$ 930.00 $ 18,600.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2505

Viales criogenicos de

polipropileno, esteriles de 2 ml

caja con 500 viales 1

Corning Cat.

No. 25704

$ 1,420.00 $ 1,420.00

CTR

Virología Virus Respiratorios 2505

Laminilla de teflón de 8 pozos de 6

mm de diamtropor pozo, de 75 X 25 X

0.8 mm, fondo blanco, caja con 72

piezas.

caja con 72 piezas

Electron Microscopy

Science CAT.

63422-06

Reamex

FORMATO UNICO PARA SOLICITUD DE ADQUISICIONES

Especificaciones técnicas

Contacto para información en InDRE :

Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos (InDRE)

Dirigido a: Q.B.P. Miguel Iguala Vidales, Jefe del Laboratorio de IRA’s virales,

Tel. directo 01 55 53410404, conmutador 0155 53427550 ext. 372

miiguala@salud.gob.mxEl Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias realizará diagnóstico de laboratorio de sus